Anika Mijakovac: Mapping the pathways that regulate IgG glycosylation. The 5th Meeting of the Human Glycom Project, Split, 23 - 24. Octobar 2024; pozvano predavanje
Aleksandar Vojta: Mining the information contained in the IgG glycome. The 5th Meeting of the Human Glycom Project, Split, 23 - 24. Octobar 2024; pozvano predavanje
Rezultati
Tranzijentni sustav na osnovi stanica HEK293 FreeStyle sa stabilno integriranim kazetama dCas9-VPR i dCas9-KRAB za aktivaciju i utišavanje ekspresije gena. Sustav je dizajniran i konstruiran tako da je u jednom koraku moguće manipulirati gen od interesa (pomoću sgRNA koje navode kazete na određeni promotor gena) te vidjeti efekt te manipulacije na glikozilaciju imunoglobulina G (IgG). To je omogućeno dizajnom plazmida koji nosi ujedno gene za laki i teški lanac IgG molekula i sgRNA koji su pod istim promotorom čime je screening 100% - sve stanice koje su izlučile IgG ujedno su i one u kojima je manipuliran (ativiran ili utišan) kandidat gen. Na taj način moguće je utvrditi funkcionalnu relevantnost određenog gen kandidata (GWAS hit za IgG glikozilaciju) u procesu glikozilacije imunoglobulina G.